前方高能!ELSD绝世秘籍惨遭泄露!

使用ELSD必须学会的那些“招式”
蒸发光散射检测器又称ELSD,是一种质量型高灵敏度通用检测器,能够检测挥发性低于流动相的任意化合物,因此ELSD非常适用于无紫外吸收或紫外末端吸收的化合物如糖类、脂类、表面活性剂,部分中药材等检测。
相较于紫外检测器和荧光检测器,ELSD检测时不依赖于化合物的光学特性,具有极强的通用性。相较于示差折光检测器,ELSD具有更高的检测灵敏度。

图示:岛津ELSD-LT II低温型蒸发光散射检测器
蒸发光散射检测器的检测原理
可理解为“三步走”:即流动相雾化、流动相蒸发、样品检测。

1.
流动相雾化
流动相在载气压力的作用下在雾化室内转变成细小的液滴,使溶剂更易于蒸发。液滴的大小和均匀性是保证检测器的灵敏度和稳定性的重要因素。
ELSD通过对气压和温度的精确控制,确保在雾化室内形成一个较窄的液滴尺寸分布,使液滴蒸发所需要的温度大大降低。
2.
流动相蒸发
载气把液滴从雾化室运送至漂移管。在漂移管内,加热状态下,溶剂被去除,留下不挥发性溶质的小颗粒。漂移管加热方式分为高温型和低温型两种。
3.
样品检测
ELSD光源采用激光或LED光源,溶质颗粒从漂移管出来后进入光检测池,穿过光源发出的光束,光束通过溶质颗粒散射后被光电倍增管收集。溶质颗粒在进入光检测池时被辅助载气所包封和快速吹出,避免溶质在检测池内分散和沉淀,极大增强了检测灵敏度并降低了对检测池表面的污染。

雾化管和漂移管
经常有用户将二者混淆,认为仪器前端的雾化管是漂移管。漂移管安装在仪器内部,需打开仪器外壳才能看见,打开前盖板看到的透明的玻璃管其实是雾化管或称雾化室。

图示:岛津ELSD-LT II型蒸发光散射检测器前端结构

图示:岛津ELSD-LT II型蒸发光散射检测器漂移管
关于低温型ELSD
为什么低温蒸发对于ELSD非常重要?ELSD是把雾化后的洗脱物通过加热的漂移管使流动相蒸发,漂移管温度是ELSD最重要的参数之一。如果温度太高,样品中热不稳定的化合物可能分解而无法检测。另外,较低的蒸发温度易形成较大的均匀的颗粒,岛津ELSD-LT II型ELSD很容易在40摄氏度蒸发100%纯水相,这种出色的性能可以获得更高的检测灵敏度和更好的稳定性。

图示:岛津ELSD-LT II型蒸发光散射检测器显示屏幕
关于载气
岛津ELSD-LT II型ELSD载气气源可使用压缩空气或者高压氮气,载气压力要稳定在350Kpa,如使用空气压缩机,为达到最佳的检测性能,压缩气体要先经过过滤装置过滤后再进入ELSD。
开启载气时,应先确认分压表关闭,再开启总阀,再调节分压阀,切记载气压力不能大于450KPa,超过这个压力极限,很可能造成仪器内部传感器损坏或气路漏气。

图示:岛津ELSD-LT II型蒸发光散射检测器显示屏幕
关于流动相
进入ELSD的流动相是要经过完全雾化和蒸发的,因此不挥发性盐类是绝对禁止使用的!其次还要注意,ELSD在使用前,应先打开仪器电源和载气,再开启输液泵,使用前要确保流动相充满虹吸管,且虹吸管两端液面平齐,一般等待至少15min以上才能达到稳定。ELSD在使用结束后,应先关闭输液泵,等到载气吹扫30分钟后再关闭载气和ELSD电源。

图示:ELSD禁止使用不挥发性盐类

图示:岛津ELSD-LT II型蒸发光散射检测器虹吸管内液面位置
ELSD的废气和废液
ELSD产生的流动相蒸发气体和溶质颗粒从检测器后面的废气管排出,废气管需通至室外,仪器使用前应检查废气管是否弯折堵塞,避免被窗户等压挤变形导致排气不畅。
ELSD产生的废液从检测器前端废液管流出,注意:废液管不可插入液面以下,必须悬空放置,使废液能够因重力作用顺畅流出。

图示:可使用废液管挂钩连接废液管,避免废液管插入液面以下造成排液不畅。

图示:岛津ELSD-LT II型蒸发光散射检测器废气管,废气管应避免弯折堵塞。
标准曲线类型非线性
使用ELSD做标准曲线时标准曲线类型不是线性:
散射光强(I)与组份质量(m)的关系为:I= kmb,k和b是与漂移管温度及流动相性质等实验条件有关的常数。
在做标准曲线时校准曲线类型一项中应选择“计算指数”。

图示:使用Labsolutions软件制作标准曲线
以上是ELSD的原理和使用时的注意事项,“绝世武功”绝非一朝一夕可以练就,除非是天生的武学奇才,但是这种人万中无一,我们还需要在日常“习武”过程中慢慢“修炼”。
后会有期!各位操舞液相的“侠客”们,来日我们在紫禁之巅,再进行绝世武功的切磋!
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