应用｜ShimNex专用柱测定抗体药物中吐温80的含量

背景介绍

吐温80又称聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯，简称聚山梨酯 -80，具有优良的乳化、分散、润湿等性能，抗体药物中吐温 80 的加入，能降低搅动、摇晃、冻融等过程中蛋白聚集，也可防止蛋白被吸附到容器表面等。在抗体药物制剂中加入吐温 80 同时也不能忽视其可能带来的毒副作用。吐温 80 是亲水性的表面活性剂，具有很强的破裂细胞膜的作用而引起刺激性，溶血性和组胺释放（致敏性）。因此建立抗体药物中吐温 80 的含量检测的方法对控制药物辅料安全性具有重要意义。本实验使用ShimNex S-C18-SAA色谱柱，建立了抗体药物中吐温 80 含量测定方法，该方法分析速度快，准确度好。

• 色谱柱：ShimNex S-C18-SAA

  （150 ×4.6 mm I.D.，5 µm，

  P/N:380-01247-24）

• 流动相：

  A：1% 乙酸 - 水溶液；

  B：1% 乙酸 - 异丙醇溶液

• 进样体积：10 μL

• 柱温：40℃

• 流速：1.0 mL/min

• 检测器：ELSD

• 漂移管温度：80 ℃

• 雾化气：350 MPa

• 洗脱方式：

  梯度洗脱，B 相起始浓度为 10%

• 对照品测试

• 供试品测定

T-1 抗体制剂色谱图（左）

T-2 抗体制剂色谱图（右）

结果表明，吐温 80 在 50-1000 μg/mL 线性浓度范围内，线性相关性良好，相关系数为 0.9947，准确度为91.2~110.3%。选择浓度为 50 μg/mL 的吐温对照品溶液分别连续进样测定 6 次。吐温 80 的保留时间 RSD% 为 0.05%；峰面积 RSD% 为 2.49%，采用ShimNex-S-SAA色谱柱建立抗体药中吐温80的含量测定方法，实验方法分析速度快，准确性好。