特色方案｜重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度分析
特色方案
SHIMSEN Ankylo SEC-150分析
重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度
摘要
本文建立了重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度（分子排阻法）的HPLC测定方法。采用色谱柱SHIMSEN Ankylo SEC-150 (7.8×300mm，3μm)分析重组人碱性成纤维细胞生长因子原液，理论塔板数为11853，主峰与二聚体的分离度良好，此方法可为重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度（分子排阻法）的检测提供参考。
关键词：重组人碱性成纤维细胞生长因子 SHIMSEN Ankylo SEC-150 HPLC
实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱：SHIMSEN Ankylo SEC-150 (7.8×300 mm，5 μm；P/N：380-01215-01)；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；
SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。
1.2 供试品溶液的制备
客户提供（1.0 mg/mL）。
1.3 分析条件
色谱柱：SHIMSEN Ankylo SEC-150 (7.8×300 mm，5 μm；P/N：380-01215-01)
柱温：28℃
检测器及波长：PDA 280 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 µL
流动相：每1L含20 mM PB，0.5 M NaCl，2 mM EDTA-Na2的溶液（pH 7.0）
（十二水合磷酸氢二钠4.38 g，二水合磷酸二氢钠1.22 g，氯化钠29.22 g，EDTA-Na2•2H2O 0.74 g，加水900 mL溶解，加氢氧化钠调pH至7.0，再加水至1000 mL。）
实验结果
按照上述色谱条件（1.3）进行采集，供试品溶液色谱图如下：
供试品溶液
重现性
供试品溶液重现性
结论
本文建立了重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度（分子排阻法）的HPLC测定方法。采用色谱柱SHIMSEN Ankylo SEC-150 (7.8×300mm，3μm)分析重组人碱性成纤维细胞生长因子原液，理论塔板数为11853，主峰与二聚体的分离度良好，此方法可为重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度（分子排阻法）的检测提供参考。
