特色方案｜盐酸雷尼替丁胶囊中N,N-二甲基亚硝胺（NDMA）的测定

本研究建立了盐酸雷尼替丁胶囊中N,N-二甲基亚硝胺的测定方法。采用岛津基毒专用柱ShimNex S-GTIs进行分离，岛津串联质谱LCMS-8050检测分析。结果显示，NDMA峰型良好，且NDMA和雷尼替丁完全分离。该方法可为盐酸雷尼替丁胶囊中N,N-二甲基亚硝胺的测定提供参考。

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1. 实验部分

01

实验仪器及耗材

Shimadzu LC-30A 与 LCMS-8050 联用系统；

色谱柱：ShimNex S-GTIs（3 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01247-31）；

纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；

SHIMSEN Disc HPPTFE针式过滤器（P/N：380-00341）；

LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

Nichipet Air移液枪：Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）；

Nichipet Air 10-100 μL（P/N：00-NAR-100）；

Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）；

Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-100006）。

02

溶液的制备

1.2.1

对照品溶液的制备

取N,N-二甲基亚硝胺（NDMA）对照品适量，加水溶解并稀释至1 ng/mL，备用。

1.2.2

供试品溶液的制备

取盐酸雷尼替丁胶囊内容物适量，加水5 mL，涡旋混匀，振荡40 min，8000 rpm离心5 min，取上清液过0.22 μm微孔滤膜，最终浓度以 API 计为30 mg/mL，备用。

1.2.3

供试品加标溶液的制备

取盐酸雷尼替丁胶囊内容物适量，加N,N-二甲基亚硝胺（NDMA）对照品溶液适量（添加浓度为：0.1 mg/kg），加水5 mL，涡旋混匀，振荡40 min，8000 rpm离心5 min，取上清液过0.22 μm微孔滤膜，最终浓度以 API 计为30 mg/mL，备用。

03

分析条件

UHPLC条件

色谱柱：ShimNex S-GTIs（3 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01247-31）

流速：0.8mL/min

进样量：10 μL

柱温：60 ℃

切阀程序：0 min（废液）→ 4.2 min（MS）→ 6.8 min（废液）

流动相：A：0.1%甲酸水

B：0.1%甲酸甲醇

梯度程序如下：

质谱条件

离子化模式：APCI，正离子扫描

扫描模式：多反应监测 (MRM)

碰撞气：氩气

接口电压：4.5 kV

雾化气：氮气 3 L/min

干燥气：氮气 5 L/min

接口温度：350℃

DL温度：150 ℃

加热模块温度：200 ℃

各化合物MRM参数见下表

2. 实验结果

盐酸雷尼替丁胶囊供试品溶液、盐酸雷尼替丁胶囊供试品加标溶液、NDMA对照品溶液色谱图如下：

为了避免高浓度的雷尼替丁成品药物进入质谱，造成污染，实验中通过调整液相洗脱程序，实现N,N-二甲基亚硝胺（NDMA）杂质与雷尼替丁药物进行分离，通过二位流通阀，0~4.2 min时间内以及6.8~15 min雷尼替丁出峰时间内切入废液，4.2~6.8 min切至质谱，进行质谱监控，由于不同色谱系统的延迟体积的差异，N,N-二甲基亚硝胺杂质与雷尼替丁的保留时间会发生变化，建议配置紫外检测器进行色谱图的监控。

方案中供试品溶液中检测到了0.1 mg/kg的NMDA，可能是因为使用60℃高柱温导致雷尼替丁降解产生NDMA，建议采用25℃或30℃进行检测，以防止假阳性或高含量NDMA检出现象的产生。