大咖说：LCMS调谐那些事（下篇）

自动调谐结束以后，会生成6页的调谐报告，分别显示Q1、Q3、以及MS/MS正负离子的调谐结果。自动调谐结束仅代表调谐结果达到工作站的预设要求，然而质谱的状况我们还要通过检查调谐结果，才能了解清楚。哪些调谐结果比较重要，下面我们一一进行介绍。

› 检测器电压：正常的电压范围在-1.5~2.7kV之间，随着质谱的使用检测器的电压会升高，性能会下降，当检测器电压升高至-2.7kV时，建议更换检测器。

›  PG Vacuum：PG代表低真空，正常压力范围在70~140Pa，低于70Pa考虑更换DL（高海拔地区除外）。

›  强度（Int）：LCMS8030/40机型，检查1004.60的质谱峰强度，分别需要达到20万或70万以上；LCMS8045/50/60机型，检查1224.75的质谱峰强度，分别需要达到10万、20万或40万以上，此为新机安装要求，随着仪器老化此强度可能会有所降低。

›  半峰宽（FWHM）：LCMS8030/40机型检查的离子，半峰宽需要满足在0.45~0.74之间；LCMS8045/50/60机型检查的离子，半峰宽需要满足在0.51~0.80之间。检查的离子，如下表所示：

注：1004.60为LCMS8030/40检查离子，1224.75为LCMS8045/50/60检查离子。

›  质量偏差：Q1/Q3、MS/MS正负离子的质量偏差≤0.15amu，需要检查的离子如下表所示：

 ›  质谱峰形：正常的质谱峰形，左右对称良好，除同位素峰外，无其他干扰。

当我们做自动调谐时，可能会出现报错，导致自动调谐不能完成。下面列举了一些自动调谐出错的原因和解决方法。

a、自动调谐刚开始，在进行检测器电压或灵敏度调节时，出现错误。

 ›  调谐液错误，可能放置了错误的调谐液或调谐液已失效，更换调谐液。

 ›  使用了非岛津专用调谐液瓶，导致气密性差，瓶内气压低，不能输送调谐液进质谱，将调谐液瓶更换为岛津专用瓶。

 ›  调谐液瓶盖未拧紧，导致气密性差，或者出现漏液，拧紧瓶盖。

 ›  其他连接接头未拧紧，导致有漏液出现，查找各接头处是否有漏液，重新拧紧漏液处接头。

 ›  管路出现堵塞，导致调谐液不能进入质谱，可能出现堵塞的位置见下图。调谐液专用管堵塞，可用有机相反向冲洗；管路过滤器堵塞，可以更换过滤片。

以上均属于调谐液未进入质谱导致自动调谐失败的原因。

 ›  毛细管组件故障，更换毛细管组件，可参看维护视频或说明书对毛细管组件进行更换。

›  DL管堵塞，检查PG压力值，当PG压力低于70Pa时，更换DL管。

›  离子源污染，检查离子源是否有污染物，可用50%异丙醇水溶液擦拭清洗离子源。

›  离子通道污染或其他硬件故障，需要与岛津售后联系，上门维护维修。

b、当自动调谐在进行负离子调谐时，出现错误。

调谐液中的负离子标准物质棉籽糖失效，棉籽糖的化学稳定性要差于PEG，因此棉籽糖更容易失效，导致负离子调谐出现错误，更换新的调谐液。

当质谱被乙酸、三氟乙酸或五氟丁酸等酸污染时，会使棉籽糖出现衍生化反应，改变调谐液中棉籽糖的浓度，进而导致负离子调谐失败。可以通过清洗离子源，消除乙酸的污染。尽量不要在流动相中添加三氟乙酸或五氟丁酸，以免对质谱造成污染。若污染无法消除，也可以改变负离子校正的质量数来进行调谐，参见下表。

c、自动调谐在其他地方出现错误，或者调谐可以通过，但是分辨率或灵敏度达不到要求，可能是离子通道Qarray、多极杆、Q1、Q3四极杆或碰撞室污染了，此时需要对质谱做维护保养。

a、调谐液专用瓶和专用管，建议只用于调谐使用，不做其他用途，以免污染。

b、调谐完成后，需要用色谱级甲醇冲洗调谐液管10min以上，否则红色阻尼管容易出现堵塞情况。

c、建议调谐文件以日期命名保存，存放在固定文件夹内，便于以后的查看对比。