了如指掌!为液相色谱柱建立健康档案
色谱柱是色谱分析的核心,也是常规的消耗品,使用得当事半功倍,使用不当消耗巨大。今天的峰形很差,测试的数据不理想,是否色谱柱出了问题?这是每个做分析的小伙伴都会遇到的情况,如何判定色谱柱的好坏?肯定有些小伙伴为之头痛。今天小编就给大家带来一个小妙招,给色谱柱建立健康档案,让您对色谱柱了如指掌,从此不再烦恼。
如何建立色谱柱的健康档案呢?
跟着小编的思路做起来,相信大家很快就能掌握。首先我们要创建健康档案的表格,其中包含一些色谱柱的信息,如:厂家、规格、型号等,可参照下边的表格根据自己的需要进行编辑。这些基础信息,可以帮助我们了解色谱柱的类型和功能。厂家不同或者厂家相同不同型号的色谱柱,即使填料一样,比如都是C18的反相柱,在实际使用中也可能对样品的分离有很大的不同。因此只有记录了这些信息,我们才能对此色谱柱有更详细的了解。如果我们想完全重复之前的实验,也要选择一模一样的色谱柱。另外色谱柱的规格,如长度和内径,都会对分离有很大的影响,因此也需要做记录。
色谱柱档案表
另外,新购买的色谱柱,一般都会附一份色谱柱的使用说明(参看图1)。在说明中,会标注色谱柱流动相适用的类别,例如反相适用水、甲醇和乙腈;正相适用于正己烷和氯仿等。用错了流动相就会造成色谱柱的损坏,因此我们也需要注意的这些信息。除此之外,我们还要关注一些其他的因素,如流动相的pH值,一般为3-7,有些宽范围的可以达到1-10等。柱温和耐压适用范围都会有说明,这些参数我们也要记录。不同规格的色谱柱,其填料的孔径和内径不同,也有适宜的流速。这些信息可以教会我们如何正确的使用色谱柱,避免造成色谱柱的损坏。
图 1(放大查看)
最后,也是最关键的一步,我们要测试色谱柱的性能。随色谱柱厂家一般也会附一份出厂报告,标明测试方法,并给出测试的结果(参看图2)。可以依据此方法,编辑我们自己的柱效测定方法。根据实验室的情况,选择一种简单的流动相,最好甲醇与水,不需要添加酸或者盐,选定的标准物质易得且稳定性好,保留时间控制在20min以内,可以选择两到三种,对他们进行测试。新反相色谱柱用纯甲醇冲洗后,就用此流动相进行平衡,接着就用设定的方法对此色谱柱的柱效进行测试。柱效信息可以包括理论塔板数、对称因子和分离度,并记录在此流动相下的柱压。得到这些信息后,我们就知道了此色谱柱最健康的状态。以后觉得色谱柱出了问题,就可以按照此方法,对色谱柱再进行测试,得到的结果与初次的数据进行对比,根据理论塔板数的值来判断柱效是否出现了下降,就可以对色谱柱的状态一目了然。也可定期使用此方法对色谱柱进行“体检”,记录每隔一段时间色谱柱的使用情况。
图 2(放大查看)
有了这份健康档案,我们就会很容易判断出,此色谱柱是否出现了问题。色谱柱的健康档案,可以帮助我们更好的了解和使用色谱柱,延长色谱柱的使用寿命,使我们的工作更顺利。小小档案用处大,柱子好坏全靠它;赶快动手做起来,工作标兵人人夸!
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