实用贴士 | 液相色谱柱的使用

性能测试

新色谱柱使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考依据 (柱性能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异有所不同，在测试中需保证方法一致性）。

流动相的配制

液相色谱是通过样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：

新色谱柱使用前冲洗步骤

日常使用注意事项

1、请使用HPLC级别以上的试剂作为流动相。

2、流动相要用0.45um孔径以下的微孔滤膜滤过。

3、流动相的pH值不能超出色谱柱的适用范围。

4、注意流动相的流动方向要与色谱柱标识的方向一致。

5、容易滋生微生物的流动相不要存放过久，要及时换新，以免微生物滋生污染色谱柱。

6、色谱柱分析结束后要及时彻底冲洗。

7、长时间不用的色谱柱要将流动相置换为色谱柱保存的溶剂，并两端用堵头封死保存。

8、色谱柱要避免剧烈碰撞、跌落等。

因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不用的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱，流速一般选择1mL/min，对于内径4.0mm柱，流速0.8mL/min为最佳。当选用最佳流速时，分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间（如使用反相柱时，可适当增加有机试剂甲醇或乙腈的含量）。