前沿合作 | LCMS-QTOF鉴定卡络磺钠原料药有关物质的结构

卡络磺钠是1992年由日本田边制药株式会社研发上市，在临床上主要用于治疗外伤手术出血等，通过降低毛细血管通透性，达到止血目的。 《日本药局方》（JP XVII）采用液相色谱法HPLC进行有关物质的控制，《中国药典》尚未收录卡络磺钠。国家标准采用薄层色谱法TLC检测卡络磺钠注射液有关物质，该方法相对简单且有关物质研究尚不深入。本文使用卡络磺钠原料药强制降解样品，建立了卡络磺钠有关物质检测的色谱-质谱联用分析方法。通过高分辨质谱仪LCMS-QTOF测定各有关物质的准确质量数推测其分子式，以及结合MS/MS特征碎片，综合鉴定出八种有关物质的结构。

基于LCMS-9030质谱的高分辨率，高质量准确度和二级特征谱图定性的功能，采用乙酸铵/乙腈质谱兼容流动相体系，建立卡络磺钠与有关物质分离条件。通过比较卡络磺钠与有关物质的母离子和特征碎片离子的相关性，对卡络磺钠八种有关物质进行科学合理的定性分析。表1列出了八种有关物质的分子式、误差和特征碎片离子。

以有关物质8的解析过程为例，有关物质8在ESI^-模式无响应，因此对ESI⁺模式的谱图进行解析。有关物质8的[M+H]⁺ 的m/z为219，[M+Na]⁺的m/z为241，分子式预测结果为C₁₀H₁₀N₄O₂，较卡络磺钠少H₂SO₃。降解实验证实该有关物质可由卡络磺钠高温、光照、酸、碱破坏得到，可能的生成机理是卡络磺钠先降解生成有关物质1，再脱磺酸生成有关物质8。该结构含有活泼氨，因此不易在ESI^-下电离，这与质谱观测结果一致。有关物质8可能的结构和裂解规律见图3，各碎片峰均得到合理归属。有关物质8为高温破坏生成的主要有关物质。

卡络磺钠临床主要的剂型是冻干，小水针和输液剂型，而小水针和输液剂型生产工艺需采用高温灭菌处理，提示有关物质8既是降解杂质又是工艺杂质，有必要对其进行质量控制。

卡络磺钠是临床止血常用药物，岛津中国创新中心与客户合作使用高分辨飞行时间质谱仪LCMS-9030成功对卡络磺钠有关物质进行结构鉴定，对于提高卡络磺钠药品质量标准和指导企业的质量控制及成品放行均具有积极的意义。